中国中药杂志

2015, v.40(22) 4378-4383

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雷公藤MCT基因的全长克隆与表达分析
Cloning and expression analysis of 2-C-methyl-D-erythritol 4-phosphate cytidylyltransferase gene in Tripterygium wilfordii

童宇茹;苏平;张萌;赵瑜君;王秀娟;高伟;黄璐琦;

摘要(Abstract):

根据雷公藤转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用全长PCR方法克隆Tw MCT全长cDNA,分析序列同源性,预测TwMCT蛋白结构,并进行序列多重比对和构建系统进化树分析;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR),以actin为内参,分析雷公藤悬浮细胞受茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后0~72 hTwMCT基因的相对表达量。克隆得到全长1 318 bp TwMCT全长c DNA,具有完整编码框,编码311个氨基酸,蛋白相对分子质量为34.14 kDa,理论等电点为8.65;RT-qPCR结果表明该基因受MeJA诱导后表达逐渐上升,在24 h时达到最高值。克隆雷公藤TwMCT全长cDNA和分析表达特性,为进一步研究该基因的功能和雷公藤次生代谢调控提供了基因元件。

关键词(KeyWords): 雷公藤;2-C-甲基-D-赤藻醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(MCT);克隆;表达分析

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(81325023,81422053,81373906);; 全国优秀博士学位论文作者专项(201188)

作者(Author): 童宇茹;苏平;张萌;赵瑜君;王秀娟;高伟;黄璐琦;

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