中国中药杂志

2009, v.34(23) 3013-3016

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位点特异性PCR方法的建立及对近源种鹿茸药材的鉴别研究
Establishment of allele-specific diagnostic PCR method for identification of antlers

王学勇;刘春生;张蓉;黄璐琦;崔光红;

摘要(Abstract):

目的:针对正品鹿茸与近源种鹿茸药材饮片鉴别的难点,建立一种简便、快速、准确的近源种鹿茸药材分子鉴别方法。方法:根据鹿科鹿属种动物Cytb全序列比对分析,设计1对能准确鉴别正品鹿茸(包括梅花鹿和马鹿)和其他近源种鹿茸的引物,在此基础上建立鹿茸药材位点特异性PCR鉴别方法,并对影响PCR结果的主要因素退火温度、Taq用量、循环次数以及模板用量和重复性等进行方法学考察和优化。结果:在方法学考察的基础上,在25μL PCR反应体系,退火温度为65℃的条件下,能准确扩增出约323 bp大小的阳性DNA条带,经测序验证结果表明,系正品鹿茸原动物的Cytb基因序列片段,而伪品鹿茸未扩增出条带。结论:所建立的位点特异性PCR方法,能将正品鹿茸与其他近源种鹿茸药材鉴别开来,具有较高的特异性、重复性,可广泛应用于鹿类药材的鉴别。

关键词(KeyWords): 位点特异性PCR;近源种鹿茸药材;鉴别

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 《中国药典》2010版一部标准研究项目(YD-195-1)

作者(Author): 王学勇;刘春生;张蓉;黄璐琦;崔光红;

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