中国中药杂志

2019, v.44(17) 3773-3779

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参芎葡萄糖注射液通过激活PI3K/AKT通路拮抗H_2O_2诱导H9c2细胞凋亡
Shenxiong Glucose Injection inhibits H_2O_2-induced apoptosis of H9c2 cells by activating PI3K/AKT pathway

陆定艳;李靖;孙佳;薛维娜;何彬;李勇军;王永林;林昌虎;刘亭;

摘要(Abstract):

探究参芎葡萄糖注射液拮抗H_2O_2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H_2O_2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,基因芯片技术检测细胞表达谱的变化,荧光定量PCR技术(qRTPCR)检测PIK3CA,Bcl-2,Bax,caspase-3,GAPDH mRNA的表达,Western blot法检测PIK3CA,AKT,P-AKT,Bcl-2,Bax,caspase-3蛋白的表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量。结果显示,不同浓度的参芎葡萄糖注射液可显著提高H_2O_2诱导的H9c2细胞存活率(P<0. 01),明显逆转H_2O_2诱导的细胞凋亡情况(P<0. 01)。芯片实验发现,参芎葡萄糖注射液处理后,H9c2细胞有138个基因表达发生改变,其中与PI3K/AKT通路相关的PIK3CA差异表达倍数较高,为3. 59倍。qRT-PCR和Western blot结果表明,参芎葡萄糖注射液可下调H_2O_2处理后H9c2细胞中caspase-3的mRNA和蛋白表达水平(P<0. 01),上调PIK3CA和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P<0. 01),并上调AKT蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。在PI3K/AKT通路抑制剂LY294002作用下,参芎葡萄糖注射液拮抗H_2O_2细胞损伤作用显著降低。结果表明,参芎葡萄糖注射液可能是通过调控PI3K/AKT信号通路来抑制H_2O_2诱导的H9c2细胞凋亡。

关键词(KeyWords): 参芎葡萄糖注射液;H9c2细胞;细胞凋亡;基因芯片;PI3K/AKT通路

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(81760699,81803827);; 贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1280号);; 贵州省科学技术厅人才团队项目(黔科合平台人才[2016]5613\5677);; 中央引导地方科技专项项目(黔科中引地[2018]4006)

作者(Author): 陆定艳;李靖;孙佳;薛维娜;何彬;李勇军;王永林;林昌虎;刘亭;

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