绿原酸人工抗原的合成及反应条件的优化Synthesis and optimize reaction conditions of chlorogenic acid artificial antigen
林辉;刘屏;王建勋;李斌;穆丽华;胡园;
摘要(Abstract)：
目的:制备中药成分绿原酸(CGA)的人工抗原,并优化合成反应条件,为中药注射剂不良反应的深入研究提供物质基础和技术基础。方法:采用碳二亚胺法,将CGA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原(CGA-BSA);正交法优化合成反应条件;经基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和紫外吸收光谱(UV)测定其偶联率(Mr)。结果:MALDI-TOF-MS和UV测得合成的人工抗原CGA-BSA的Mr分别为20和18.8;反应最佳条件为NHS,EDC,BSA与CGA的比率为4:1,1:1,1:200,pH为9。结论:成功合成了绿原酸全抗原(CGA-BSA),为进一步深入研究绿原酸的过敏原性及其相关性研究提供物质基础。
关键词(KeyWords)： 绿原酸;基质辅助激光解吸飞行时间质谱;完全抗原
基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(90709040)
作者(Author): 林辉;刘屏;王建勋;李斌;穆丽华;胡园;
Email:
参考文献(References)：
- [1]赖宇红,陈浩桉,杨卫荣.中药注射剂变态反应研究亟待加强[J].中药新药与临床药理,2002,13(5):324.
- [2]Freedman S O.Antigenic properties of chlorogenic acid[J].J Allergy Clin Immunol,1964,35:97.
- [3]Freedman S O,et al.Chlorogenic acid:an allergen in green cof-fen bean[J].Nature,1961,192:241.
- [4]杨慧,刘志刚,韩庆国,等.艾蒿、青蒿花粉变应原组分的研究[J].免疫学杂志,2004,20(2):120.
- [5]Layton L L.Castor bean allergy as hypersensitivity to the spurges(Euphorbiaceae):absence of reaction to chlorogenic acid in pri-mary allergy to castor bean[J].lnt Arch Allergy,1963,23:225.
- [6]Layton L L.Nondiffusible allergenic contaminant isolated from samples of chlorogenic acid causing allergic reaction:Pure chlo-rogenic acid not an allergen[J].J Allergy,1966,35(5):268.
- [7]孙武勇,刘向辉,屈凌波,等.阿莫西林完全抗原的合成与鉴定[J].郑州大学学报,2007,42(1):72.
- [8]蔡碧双,邵幼岩,林纪昀,等.甘草酸人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析[J].中国生化药物杂志,2008,29(1):19.
- [9]余若祯,何苗,施汉昌,等.2,4-D完全抗原的合成及其免疫性能评价[J].环境科学,2006,27(1):146.
- [10]杨利国,胡少昶,魏平华,等.酶免疫测定技术[M].南京:南京大学出版社,1998:280.